ヒト間葉系幹細胞（hMSC）から骨芽細胞に分化誘導できるキットです。

本研究では,合成副腎脂質ホルモンの一つであるデキサメサゾン(Dex)の骨芽細胞分化に対する影響とその分子機構について解析を行った。 ..

ヒト間葉系幹細胞（hMSC）から軟骨細胞に分化誘導できるキットです。

デキサメタゾンは脂肪生成能を増強することにより分化のために脂肪細胞前駆細胞をプライムする【JST・京大機械翻訳】 ..

ヒト間葉系幹細胞（hMSC）から骨芽細胞に分化させた例
培養後1週間程度で写真のような石灰化が確認できます。

TGF-β、dexamethasone、ITS supplementおよびascorbateを含む培地で、幹細胞から軟骨細胞への分化に適した条件に設定してあります。

本研究の目的は、ドキシサイクリンおよびデキサメタゾンを添加したコラーゲン膜が、骨芽細胞の増殖および分化に及ぼす影響を評価することであった。

第1章 筋衛星細胞の初代培養を用いた脂肪分化能評価系の確立

Β-glycerophosphate、Dexamethasone（DEX）およびAscorbateを含む培地で間葉系幹細胞を培養すると、骨芽細胞に分化することが知られています。これらを含む分化誘導培地をヒト間葉系幹細胞（hMSC）から骨芽細胞への分化に適した条件に設定してあります。

芽細胞に分化させることが可能である。我々はこれまでに、ラットやラビットな ..

まず、初代培養の筋衛星細胞が脂肪分化能を有することを確認するとともに、脂肪分化能を定量的に評価する系を確立することを目的として実験を行った。成熟雄ラット(8〜10ヶ月齢以上)の背部及び後肢骨格筋から酵素処理により筋衛星細胞を採取した。筋衛星細胞の初代培養は10%ウシ胎子血清を含む培地(通常培地)で培養した場合、その90%以上が筋細胞マーカー(M-cadherin、desmin、MyoD)を発現しており、培養期間の経過とともにミオシン重鎖陽性を示す多核の筋管細胞が多数出現した。一方、通常培地にインスリン、デキサメタゾン、IBMXを添加した培地(脂肪分化誘導培地)で10日間培養すると、多くの細胞は筋管細胞へと分化したものの、細胞内にオイルレッドO陽性の脂肪滴を含む細胞が新たに出現した。これらの細胞は脂肪細胞のマーカーであるPPARγ、C/EBPαに対する抗体を用いた免疫染色によっても陽性を示し、なおかつPPARγアイソフォームのうち脂肪細胞特異的といわれるPPARγ2の遺伝子発現量も増加していたことから、確かに脂肪細胞であると結論された。また、脂肪前駆細胞株3T3-L1において脂肪分化を促進するPPARγアゴニストであるトログリタゾンを脂肪分化誘導培地に添加して筋衛星細胞を培養したところ、トログリタゾン無添加時に比べてオイルレッドO、PPARγ、C/EBPα陽性細胞のいずれもが有意に増加したことから、筋衛星細胞の脂肪分化は、脂肪前駆細胞が脂肪細胞へと分化するのと共通の機構によるものであると推察された。一方、筋衛星細胞の細胞株として、筋分化の研究にしばしば用いられるマウス筋衛星細胞由来のC2C12や、ラット筋衛星細胞由来のL6を脂肪分化誘導培地にて培養した場合にはトログリタゾン存在下であっても、脂肪細胞の出現は見られなかった。これらの細胞は筋への分化能を指標に選抜されてきたものであり、生体内における筋衛星細胞の脂肪分化能を評価する上では適当ではないと考えられた。

一晩培養後、細胞が凝集するため、軟骨細胞分化誘導培地を添加して培養する。

ニンジン抽出物は通常培地とインスリン添加培地においては前駆脂肪綱胞の分化促進作用を示すが、デキサメタゾン等添加培地では分化阻害作用を示す。

生体の様々な組織には組織特異的幹細胞とよばれる細胞集団が存在しており、当該組織の恒常性維持や修復に重要な役割を演じている。筋線維上には筋衛星細胞とよばれる細胞が存在している。この細胞は通常休止状態にあり、特定の細胞系譜に特異的なマーカーの発現は見られないものの、筋線維が損傷すると、損傷部位に近傍の筋線維上の筋衛星細胞が活性化され、分裂増殖を開始する。活性化された筋衛星細胞は筋細胞への決定を受けて筋芽細胞となり、筋芽細胞は最終分化を遂げて融合し多核の筋管細胞となる。筋管細胞はその後、成熟して筋線維となり再生が完了する。これらのことから、筋衛星細胞は筋細胞になることが運命づけられた一種の組織特異的幹細胞であると考えられてきたが、近年の研究により、特定の培養条件下では脂肪細胞、骨細胞、軟骨細胞へも分化する、いわゆる多能性幹細胞としての性質をも併せもつことが明らかとなっている。従って、ある種の条件下で骨格筋内に出現する脂肪細胞は、もともと骨格筋内に存在する筋衛星細胞が何らかの機構により脂肪分化したものである可能性が極めて高い。しかし、生体内で筋衛星細胞の多分化能がいかにして制御されているかについては不明である。そこで本研究では、筋衛星細胞の多分化能のうち、脂肪分化能に着目し、生体内におけるその制御機構を明らかにすることを目的とした。

培養開始して3～4週間後にアルシアンブルーで染色した写真。軟骨細胞に分化したことが確認できる。

ロファージに分化する段階、マクロファージの貪食能、細胞障害作用 ..

CL-173）、ラット褐色／白色脂肪前駆細胞、マウス／ラット／ウサギ骨髄細胞などの動物細胞を効率よく脂肪細胞へと分化誘導する試薬である。
3T3-L1細胞は休止期に入ると脂肪細胞へと分化する性質を持っているがインシュリン、デキサメタゾン（DEX）、3-イソブチル-1-メチルキサンチン（IBMX）などのいくつかの薬剤で刺激することにより効率よく分化することが知られており、脂肪細胞分化の研究に広く用いられている。本キットには分化誘導する3種類の試薬（インシュリン、3-イソブチル-1-メチルキサンチン、デキサメタゾン）が含まれており、各細胞に適した培地に添加して培養するだけで脂肪細胞へと分化させることができる。

[PDF] 脂肪細胞分化/ 維持試薬 AdipoInducer Reagent (for animal cell)

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

1． 分化培地を用意する。（増殖培地 10 ml に対して添加試薬（1）インシュリン

（株）バイオ未来工房の製品のみで、幹細胞の分離から、各細胞への分化誘導・確認まで行えます。
（）内の英数字は商品コードを示します。商品コードが記載されている製品については、製品名をクリックすると各製品の詳細をご覧になれます。

骨芽細胞分化におけるBMP-2とDexamethasoneの影響

ヒト間葉系幹細胞（Mesenchymal Stem Cells、hMSC）に特化した著書は非常に少なく、研究機関などの関係者の方々から「hMSCに特化したテキストが欲しい」との声をいただき、『間葉系幹細胞ハンドブック～分離・培養・特性解析、再生医療への応用～』を発刊しました。組織からの間葉系幹細胞の分離培養から、拡大培養、分化誘導、その他の応用について、操作方法を中心に説明した実用的な書籍です。担当者ならおさえておきたい留意点やノウハウが満載です。

骨芽細胞分化におけるBMP-2とDexamethasoneの影響

私たちはこれまでに、道管分化をマスター因子としてNACドメイン転写因子をコードするVND6、およびVND7を同定した（Kubo et al., 2005, Genes Dev.; Yamaguchi et al., 2008, Plant J）。
そこで本研究では、これらマスター因子にヘルペルウイルスVP16の転写活性化ドメイン、およびラットのグルココルチコイドレセプタードメインを融合させることで、デキサメタゾン（DEX）依存的に活性が誘導されるコンストラクトを構築し、形質転換体を作出した。まず、シロイヌナズナに導入した形質転換体では、DEX処理することにより、植物体全体が白色化し死んでしまった。植物体を観察したところ、ほとんどの細胞が二次細胞壁を持つ道管細胞へと分化転換していた（図）。また、道管分化に関与する酵素や転写因子の多くがDEX処理により発現が誘導されており、二次細胞壁に多く含まれる多糖であるキシラン蓄積量も増加していた。さらに、このコンストラクトをシロイヌナズナやタバコの培養細胞やポプラに導入したところ、それぞれDEX依存的に分化転換した道管細胞が観察された。特に、タバコBY-2細胞において90％以上の細胞が分化転換するラインを確立することに成功した。

これらの結果は、今回構築したコンストラクトが、道管細胞分化の分子機構を解析するうえで非常に有効であることを強く示している。

3T3-L1細胞からAdipocyte-like細胞への分化誘導

一般に幹細胞の分化は、それが存在する周囲の環境に大きく依存する。従って、筋衛星細胞が骨格筋内に存在する多能性幹細胞であることを考慮すれば、その分化能には周囲に存在する筋線維が影響している可能性が高い。事実、霜降り肉を例に挙げれば、脂肪交雑の生じやすい筋と生じにくい筋が見られる。そこで、本章では筋衛星細胞の脂肪分化が、それが由来する骨格筋により異なるかどうかについて、まず検討した。成熟雄ラット(14ヶ月齢)の背部骨格筋(背筋)、後肢骨格筋であるヒラメ筋、長趾伸筋、前脛骨筋、大腿四頭筋それぞれから筋衛星細胞を採取し、トログリタゾンを添加した脂肪分化誘導培地中で培養した。その結果、オイルレッドOによる染色、C/EBPαの免疫染色いずれを指標にした場合にもヒラメ筋由来の筋衛星細胞で最も高頻度に脂肪細胞が出現し、背筋と長趾伸筋由来での出現は中頻度、前脛骨筋、大腿四頭筋由来では低頻度であった。筋衛星細胞を採取した各骨格筋の筋線維型の分布を調べたところ、遅筋型筋線維の割合と筋衛星細胞に脂肪分化を誘導した場合の脂肪細胞の出現率には極めて高い相関が見られた。また、ヒラメ筋、前脛骨筋それぞれに由来する筋衛星細胞の脂肪分化能の違いは、2日齢の雄ラットや2ヵ月齢、9ヶ月齢の雄ラットを用いた場合でも同様であった。ここで筋衛星細胞を脂肪分化誘導処置することにより脂肪細胞が出現する条件下でも、依然として筋管細胞の形成が見られたことと、脂肪分化能をもつ筋衛星細胞の占める割合と筋衛星細胞が由来する骨格筋の遅筋型筋線維の割合との高い相関関係が示されたことから、脂肪分化誘導条件下で依然として形成される筋管細胞のミオシン重鎖のアイソフォームと脂肪細胞の出現率との間にも相関がある可能性を考えた。最も高い脂肪細胞の出現率が観察されたヒラメ筋由来の筋衛星細胞と、脂肪細胞の出現率が低かった前脛骨筋由来の筋衛星細胞を7日間、通常培地で培養し、形成された筋管細胞の筋線維型を遅筋型、速筋型ミオシン重鎖を認識する抗体を用いてそれぞれ免疫染色した。その結果、ヒラメ筋由来の筋衛星細胞から形成された筋管細胞では遅筋型、速筋型がそれぞれ同程度であったのに対して、前脛骨筋に由来する筋衛星細胞から形成された筋管細胞では、ほぼすべてが速筋型で、遅筋型はほとんど観察されなかった。以上の結果から、筋管細胞が存在する培養条件下では、筋管細胞に由来する液性因子を介して筋衛星細胞の脂肪分化が制御されている可能性が示された。

[PDF] 学位論文 間葉系幹細胞から骨芽細胞への分化段階に ..

（株）バイオ未来工房の製品のみで、幹細胞の分離から、各細胞への分化誘導・確認まで行えます。
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を添加して骨芽細胞に分化誘導。 分化誘導初期（3日）にて骨芽細胞

2005, Genes Dev）。また、VND7をグルココルチコイドレセプタードメインと融合させることで、デキサメタゾン（DEX）依存的に道管分化を効率的に誘導可能なシステムを構築した(Yamaguchi et al.

[PDF] 脂肪前駆細胞の分化と脂肪生成を抑制する 薬用植物中のフラボノイド

ヒト間葉系幹細胞（Mesenchymal Stem Cells、hMSC）に特化した著書は非常に少なく、研究機関などの関係者の方々から「hMSCに特化したテキストが欲しい」との声をいただき、『間葉系幹細胞ハンドブック～分離・培養・特性解析、再生医療への応用～』を発刊しました。組織からの間葉系幹細胞の分離培養から、拡大培養、分化誘導、その他の応用について、操作方法を中心に説明した実用的な書籍です。担当者ならおさえておきたい留意点やノウハウが満載です。

[PDF] 骨基質タンパク質オステオカルシンの分子構造と 骨分化 ..

骨髄は造血細胞とそれを支持する骨髄間質細胞に分けることができます。この骨髄間質細胞の一部には未分化な間葉系幹細胞も含まれており、骨芽細胞や軟骨細胞、脂肪細胞などに分化誘導することができます。

ベルでは、造血系の分化細胞における特定の免疫細胞サブセット上にも発現します。

2010, Plant Phyisol)。この誘導システムを用いて、DEXと同時にタンパク質阻害剤であるシクロヘキシミドを処理することで、VND7により直接発現が制御される遺伝子の探索を行った。その結果、35SプロモーターによるVND7過剰発現体において発現が上昇する300の遺伝子のうち、63の遺伝子がVND7により直接制御されることが明らかとなった。それらの中には、転写因子の他、二次細胞壁形成やプログラム細胞死など道管要素分化に関わる遺伝子が含まれていた（図１）。プログラム細胞死に関与するXCP1について詳細な解析を行ったところ、プロモーターの約140 bpの領域がVND7による発現制御に重要であること、さらにその領域中には少なくとも2カ所 VND7が結合することが明らかとなった。これらの結果より、VND7は道管要素の分化過程において下流の転写因子を介した発現制御だけでなく、多くの遺伝子について直接発現を制御していることが明らかとなった。